Martes, 13 Junio 2017 18:57

Protocolos para muestras de orina

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SIEMBRA PRIMARIA DE MUESTRA DE ORINA 

Se aplica para el cultivo de muestra de orina en el diagnóstico bacteriológico de infecciones del tracto urinario.

Materiales y equipos

a) Asa calibrada de platino o descartable de 0,001 mL ó 0,01 mL.

b) Estufa de 35 – 37 °C.

c) Mechero Bunsen o cabina de flujo laminar.

d) Guantes de látex.

e) Contenedor de material contaminado.

f) Pinza estéril.

g) Propipeta o pipetor automático.

h) Medios de cultivo: Placas con agar sangre de carnero (AS), Placas con agar Mc Conkey (McC)

Procedimiento

a) Mantener las muestras en refrigeración (4 °C) hasta su procesamiento por cultivo.

b) Los cultivos deben realizarse en una cabina de bioseguridad o cerca del mechero Bunsen.

c) Las placas con AS y McC que se utilizarán en el urocultivo deben estar a temperatura ambiente. Rotular las placas.

d) Si el asa calibrada no es descartable, esterilizar el asa de siembra flaméandola en el mechero Bunsen hasta que se ponga rojo vivo. Dejar enfriar el asa.

e) Tomar el frasco con la muestra de orina, abrir la tapa y flamear la boca del frasco en el mechero Bunsen.

f) Tomar la muestra de orina con el asa de siembra estéril introduciéndola y sacándola del frasco en forma vertical. Tapar el frasco con la muestra.

g) Inocular en el centro de la placa con AS a partir del cual se extiende la muestra, hacia delante y hacia atrás.

h) Luego, sin quemar el asa, el inóculo se disemina uniformemente con trazos perpendiculares a la siembra inicial en toda la placa.

i) Proceder de la misma forma para el agar Mc Conkey. 

j) Esterilizar el asa de siembra en el mechero.

k) Concluida la siembra, cerrar la placa y colocarla con la parte que tiene el medio de cultivo hacia arriba. Incubar la placa de AS y Mc Conkey a 35 – 37° C en condiciones aeróbicas por 24 horas.

Asas de siembra recomendadas para cada método de muestras de orina:

Método Asa 0.001 ml Asa 0.01ml
Chorro medio x  
Catéter    x  
Aspiración suprapúbica   x
1 COLONIA   1000UFC/ml    100UFC/ml

Lectura

a) Realizar la evaluación a las 24 horas, si no hay crecimiento bacteriano dejar incubar hasta las 48 horas.

b) La evaluación consiste en realizar el recuento de colonias, cuyo resultado se multiplica por el factor de dilución para obtener las UFC por mL.

Interpretación

a) En pacientes sin sonda vesical, la cuenta significativa de bacterias en orina es la presencia de más de 105 UFC / mL de un solo germen.

b) Los recuentos intermedios (103 – 104 UFC/mL) indican infección si el procedimiento de recolección de orina fue realizado correctamente.

c) Generalmente, el aislamiento de tres o más especies bacterianas indican que la muestra se ha contaminado por recolección inadecuada o demora en la siembra.

d) En pacientes con sonda vesical, cuentas bacterianas menores de 105 UFC/mL pueden tener significado, así también se pueden encontrar bacteriurias polimicrobianas hasta en casi 15% de enfermos.

e) En pacientes sin catéter se puede comprobar si el procedimiento de obtención de muestra fue realizado correctamente, observando la frecuencia con la cual se informan recuentos de colonias intermedias entre 103 – 104 UFC/mL. En pacientes sin infecciones del tracto urinario, el recuento es nulo o se reduce a pocas colonias.

f) En muestras obtenidas por punción suprapúbica, el desarrollo de una sola colonia en el medio de cultivo indica infección del tracto urinario.

Nota 1: Se usará asas de siembra 0,001 mL para todas las muestras de orina a excepción de aquellas procedentes de aspirados suprapúbicos, de infantes, de niños y de pacientes con tratamiento antimicrobiano, las cuales se inocularán con asas de 0,01 mL debido a que en dichos pacientes pueden haber infecciones del tracto urinario asociados a recuentos menores de 105 UFC/ml.

Nota 2: De no contar con asa calibrada, utilizar tips estériles y micropipeta de 1μL ó 10 μL

Fuente: Manual de Procedimientos Bacteriológicos en Infecciones Intrahospitalarias. MINSA-INS. 2005.

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