Martes, 13 Junio 2017 19:00

Protocolos de muestra de herida operatoria

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SIEMBRA PRIMARIA DE MUESTRA DE HERIDA OPERATORIA

Describir los procedimientos de cultivo de muestra de herida para el diagnóstico bacteriológico en infecciones de herida abierta y abscesos.

Materiales y equipos

a) Estufa de 35 – 37 °C.

b) Cabina de flujo laminar o mechero Bunsen.

c) Guantes de látex.

d) Contenedor de material contaminado.

e) Medios de cultivo.

– Agar sangre de carnero (AS)

– Agar Mc Conkey (McC)

– Pueden incluirse otros medios (ejm. Manitol salado, agar Columbia CNA con 5% de sangre de carnero, etc.)

Procedimiento

a) Realizar los cultivos en una cabina de bioseguridad o cerca del mechero Bunsen.

b) Utilizar placas con medios de cultivo cuando éstas hayan alcanzado la temperatura ambiente.

c) Inoculación de la muestra:

– Muestra de aspirado purulento: Con una pipeta Pasteur inocular una gota de la muestra en un extremo de la superficie de la placa de agar de sangre de carnero, agar Mc Conkey u otros medios.

– Hisopado de secreción: Frotar rotando el hisopo sobre la superficie de los medios de cultivo tratando que toda su superficie haga contacto con el agar, empezando con el agar sangre de carnero, Mc Conkey u otros medios.

d) Esterilizar el asa de siembra en el mechero de Bunsen hasta que se ponga rojo vivo.

e) Dejar enfriar el asa.

f) Utilizando el asa de siembra y tomando como referencia central el inóculo de la muestra, realizar la siembra por dispersión agotamiento en cuatro cuadrantes de la placa con el propósito de obtener colonias aisladas.

g) Incubar las placas de AS a 35 °C por 24 horas y el agar McC en condiciones aeróbicas y por 24 horas.

h) Esterilizar el asa de siembra en el mechero.

i) Concluida la siembra, cerrar la placa y colocarla con la parte que tiene el medio de cultivo hacia arriba.

j) Incubar las placas a 35 – 37 °C por 24 – 48 horas en condiciones aeróbicas.

Lectura

A las 24 horas observar el crecimiento de colonias. Si no se observa crecimiento, seguir incubando hasta las 48 horas.

Fuente: Manual de Procedimientos Bacteriológicos en Infecciones Intrahospitalarias. MINSA-INS. 2005.

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